- 薛栋;李凡妮;肖宝安;孙祺;
目的 :研究整合素αvβ6缺失细胞外调节蛋白激酶2(ERK2)结合位点对结肠癌SW480细胞基因表达调控的影响。方法:构建稳定转染β6基因结构的结肠癌SW480细胞(SW480β6)和缺失ERK2结合位点的缺失突变型β6转染的SW480细胞(SW480β6Del.mutant),并通过Western blot实验检测整合素αvβ6、总ERK(t-ERK)及磷酸化ERK(p-ERK)表达水平,通过Transwell实验检测整合素αvβ6缺失ERK2结合位点对SW480细胞侵袭能力的影响。通过RNA测序研究整合素αvβ6缺失ERK2结合位点对SW480细胞基因表达谱的影响,并对差异表达基因(DEGs)进行GO和KEGG功能富集分析。结果:SW480β6和SW480β6 Del.mutant细胞均高表达αvβ6,两者之间的t-ERK表达水平差异无统计学意义(P>0.05),SW480β6 Del.mutant细胞p-ERK2水平较SW480β6细胞明显降低,且侵袭能力也明显下降(P<0.05)。通过RNA测序,在SW480β6Del.mutant细胞中共筛选出2249个DEGs,包括上调基因936个,下调基因1313个,DEGs显著富集在癌症通路、PI3K-AKT通路、MAPK通路、细胞与细胞因子受体互作方面。结论:整合素αvβ6通过αvβ6-ERK2直接连接提高ERK2的磷酸化水平,激活MAPK信号通路,促进结肠癌细胞侵袭。缺失整合素αvβ6-ERK2直接连接后,DEGs除富集于MAPK通路外,还富集于多条在结肠癌中具有重要作用的通路,提示在结肠癌中各种信号通路具有互补作用,多靶点药物对结直肠癌是一种有前景的治疗方式。
2023年07期 v.26 505-510页 [查看摘要][在线阅读][下载 2202K] - 张欣;霍浩然;张振翼;尹立阳;房娉平;袁增江;
目的:研究紫草素对人胃癌MGC803细胞自噬和凋亡的影响及作用机制。方法 :取对数生长期MGC803细胞,设空白对照组、紫草素组、紫草素+IGF-1(PI3K激活剂)组、紫草素+LY294002(PI3K抑制剂)组。药物干预24 h后,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡,GFP-LC3质粒转染法观察细胞自噬小体,Western blot法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR、Caspase-3、cleaved Caspase-3、LC3、Beclin-1的表达。结果:与空白对照组比较,紫草素组细胞增殖抑制率、凋亡率升高(P<0.05),自噬小体数量明显增多,PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平降低(P<0.05),cleaved Caspase-3/Caspase-3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及Beclin-1表达量升高(P<0.05)。IGF-1可明显逆转紫草素对MGC803细胞增殖抑制、凋亡、自噬,PI3K、Akt、mTOR磷酸化和cleaved Caspase-3/Caspase-3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值等的调控作用,LY294002可明显加强紫草素对MGC803细胞上述调控作用。结论:紫草素可促进MGC803细胞自噬和凋亡,可能与抑制PI3K/Akt/mTOR通路有关。
2023年07期 v.26 511-515页 [查看摘要][在线阅读][下载 1067K] - 刘昊中;刘伟;刘凯;夏旭良;李云龙;唐立;
目的:探究LINC01287在甲状腺癌中的表达及对细胞增殖、侵袭的影响。方法:收集16例甲状腺癌患者的癌组织及其癌旁组织(距癌组织3 cm)标本,体外培养人正常甲状腺上皮细胞TEC61及人甲状腺癌细胞(BCPAP、TPC-1、FTC-133、8505C、SW1736),q RT-PCR检测甲状腺癌组织和细胞中LINC01287表达情况。利用细胞转染技术分别将LINC01287-sh RNA(sh-LINC01287)及其阴性对照(sh-NC)转染至FTC-133细胞中(sh-LINC01287组、sh-NC组),同时设置正常培养的对照(Control)组。MTT实验、克隆形成实验检测各组FTC-133细胞增殖情况;Transwell实验检测各组FTC-133细胞侵袭情况;Western Blot实验检测各组FTC-133细胞增殖、侵袭相关蛋白(细胞周期蛋白D1,Cyclin D1;神经型钙黏附蛋白,N-cadherin;基质金属蛋白酶9,MMP-9)表达情况。结果:LINC01287在甲状腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织(P<0.05);LINC01287在BCPAP、TPC-1、FTC-133、8505C、SW1736细胞中的表达水平均高于TEC61细胞,且在FTC-133细胞中最高(P<0.05),故选取FTC-133细胞进行后续实验;与Control组和sh-NC组比较,sh-LINC01287组FTC-133细胞的增殖率降低,克隆形成数、侵袭数及Cyclin D1、N-cadherin、MMP-9蛋白表达均减少(P<0.05)。结论:LINC01287在甲状腺癌中高表达,敲低LINC01287表达可抑制FTC-133细胞增殖和侵袭,LINC01287可能是甲状腺癌潜在的治疗靶点或预后生物标志物。
2023年07期 v.26 516-520页 [查看摘要][在线阅读][下载 1212K] - 肖钟;李文静;王勇;
目的 :探讨circ_0007841靶向miR-513a-5p对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 :RT-q PCR检测胃癌组织、癌旁组织、胃癌细胞HGC-27以及人胃黏膜细胞GES-1中circ_0007841和miR-513a-5p表达。双荧光素酶报告实验确定circ_0007841和miR-513a-5p相互作用。将HGC-27细胞分为si-NC组、si-circ_0007841组、miR-NC组、miR-513a-5p mimic组、si-circ_0007841+miR-513a-5p Inhibitor组。CCK-8法检测HGC-27细胞存活率;平板克隆实验检测HGC-27细胞克隆形成数;划痕愈合实验和Transwell实验检测HGC-27细胞迁移能力;Transwell实验检测HGC-27细胞侵袭能力。结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中circ_0007841相对水平显著升高(P<0.05),miR-513a-5p相对水平显著降低(P<0.05)。与GES-1细胞比较,HGC-27细胞中circ_0007841相对水平显著升高(P<0.05),miR-513a-5p相对水平显著降低(P<0.05)。circ_0007841和miR-513a-5p直接特异性结合。与si-NC组比较,si-circ_0007841组HGC-27细胞存活率、克隆形成数、划痕愈合率、迁移数、侵袭数显著降低(P<0.05),miR-513a-5p相对水平显著升高(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-513a-5p mimic组HGC-27细胞存活率、克隆形成数、划痕愈合率、迁移数、侵袭数显著降低(P<0.05)。与si-circ_0007841组比较,si-circ_0007841+miR-513a-5p Inhibitor组HGC-27细胞存活率、克隆形成数、划痕愈合率、迁移数、侵袭数显著升高(P<0.05)。结论:干扰circ_0007841通过靶向上调miR-513a-5p表达来抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移。
2023年07期 v.26 521-526页 [查看摘要][在线阅读][下载 1312K] - 邓进巍;刘燕;李凯;
目的:分析姜黄素影响肝癌(LC)细胞系BEL-7402体外侵袭、转移与增殖及其潜在分子机制。方法:对BEL-7402细胞实施浓度不等的姜黄素(0、30、60μmol/L)干预,经由四甲基偶氮唑蓝(MTT)技术对细胞的增殖情况展开测定,Transwell法对细胞侵袭与迁移活性展开测定;用姜黄素(60μmol/L)处理BEL-7402细胞,Western blot法检测细胞内Toll样受体4(TLR4)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达情况。结果:MTT实验显示,在BEL-7402细胞增殖能力上,相较空白对照组,姜黄素1组、2组皆显著偏低(P<0.05)。Transwell侵袭和迁移实验结果显示,相较于空白对照组,姜黄素1组和姜黄素2组BEL-7402细胞侵袭能力和迁移能力均显著降低(P<0.05)。Western blot结果表明,姜黄素2组BEL-7402内mTOR、TLR4蛋白表达量显著下调(P<0.05)。结论:对于LC细胞BEL-7402的增殖、转移与侵袭,姜黄素具抑制功能,其机制和下调信号途径TLR4/mTOR可能相关。
2023年07期 v.26 527-530页 [查看摘要][在线阅读][下载 1201K]
- 丁伟;吕帝;刘小华;胡书群;
目的:基于Nomogram图建立预测甲状腺术后发生低钙血症的模型,并探究该模型的临床价值。方法:纳入徐州医科大学附属医院2020年11月—2021年11月收治的247例甲状腺手术患者,按照其术后低钙血症发生情况,将患者分别纳入发生组、未发生组。运用单因素和多因素Logistic回归模型,分析影响患者发生低钙血症的相关因素。以独立危险因素构建二元Logistic回归并建立Nomogram图预测模型,并纳入74例甲状腺手术患者,验证模型的效能。结果:247例患者中,共有82例(33.20%)发生低钙血症。多因素Logistic回归模型示,女性、手术时间≥100 min、甲状旁腺腺体损伤均为影响甲状腺术后发生低钙血症的独立危险因素,单侧腺叶加峡部加对侧部分切除为保护性因素(P<0.05)。将基于独立危险因素建立的Nomogram图应用于训练集行内部验证,AUC为0.869 (95%CI:0.820~0.918);验证集外部验证结果显示,AUC为0.876(95%CI:0.796~0.956),校正曲线均接近理想曲线,预测概率与实测值基本一致。结论:甲状腺术后患者低钙血症发生风险较高,且性别、手术时间、甲状旁腺腺体损伤情况、切除范围均与低钙血症的发生有关,结合上述因素构建的Nomogram图模型的预测准确性良好,能够为低钙血症的防治提供客观参考。
2023年07期 v.26 531-536页 [查看摘要][在线阅读][下载 1602K] - 孙建彬;崔晶;杨程鹏;
目的:探讨Numb、CCDC78基因表达与结直肠癌(CRC)疾病演进的相关性及其对患者不良预后的预测价值。方法:选取结直肠石蜡标本182例,其中结直肠良性病变组织30例,CRC组织标本及对应癌旁组织标本各60例,淋巴结转移癌组织32例。比较良性病变组织、淋巴结转移癌组织、癌组织与相对应癌旁组织中Numb、CCDC78 mRNA表达水平,采用χ~2检验比较Numb、CCDC78高表达与低表达患者临床病理差异;采用Pearson相关性分析检验CRC组织中Numb、CCDC78 mRNA表达的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析Numb、CCDC78阳性对CRC患者不良预后的预测价值。结果:CRC组织中Numb mRNA相对表达量显著低于癌旁组织(P<0.05);CCDC78 mRNA相对表达量则显著高于癌旁组织(P<0.05)。淋巴结转移癌组织Numb、CCDC78蛋白阳性表达率最高,CRC组织、腺瘤组织、癌旁组织依次降低(P<0.05)。以基因表达量均数为依据将60例患者分为Numb mRNA低表达与高表达组,Numb mRNA表达水平与分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。以基因表达量均数为依据将60例患者分为CCDC78 mRNA低表达与高表达组,CCDC78 mRNA表达水平与淋巴结转移有关(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,CRC组织中Numb与CCDC78 mRNA表达呈负相关(r=-0.714,P<0.001,95%CI:-0.854~-0.481)。ROC曲线显示Numb、CCDC78 mRNA表达在预测患者不良预后中有较高诊断效能,AUC分别为0.863、0.800。结论:Numb、CCDC78基因异常表达与结直肠癌疾病演进密切相关;Numb、CCDC78可作为预测结直肠癌转移及不良预后的可靠标志物。
2023年07期 v.26 537-542页 [查看摘要][在线阅读][下载 1489K] - 夏骏;李玲玉;高文静;朱爽;
目的:分析浆细胞性乳腺炎(PCM)的发病危险因素,且构建预测PCM发病的列线图模型。方法:选择2016年1月—2021年12月收治的PCM患者120例(PCM组),另选同期非乳腺疾病的健康人群120例(对照组),比较两组临床病理资料,采用Logistic回归分析影响PCM发病的危险因素,构建预测PCM发病的列线图模型,再用受试者工作特征(ROC)与校准曲线进行模型验证。结果:PCM组与对照组在哺乳时间、体质指数、月经规律、乳头凹陷、乳房外伤、哺乳障碍、情绪焦虑、失眠、避孕药物史、泌乳素方面比较差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,哺乳时间<6个月(OR=1.828,95%CI:1.044~3.201,P=0.035)、有避孕药物史(OR=1.793,95%CI:1.029~3.122,P=0.039)、乳头凹陷(OR=2.336,95%CI:1.341~4.068,P=0.003)、泌乳素异常(OR=1.752,95%CI:1.011~3.037,P=0.046)、有哺乳障碍(OR=1.870,95%CI:1.073~3.256,P=0.027)为PCM发病的独立危险因素。ROC曲线下面积为0.710(95%CI:0.645~0.776),提示该列线图预测模型有较好的区分度,对PCM有较强的预测能力;校准曲线斜率接近1,Hosmer-Lemeshow拟合优度检验提示该列线图预测模型的预测概率与实际概率有较好的一致性(χ~2=6.661,P=0.465)。结论:基于PCM的5项发病危险因素(哺乳时间、避孕药物史、乳头凹陷、泌乳素、哺乳障碍)构建的列线图预测模型预测能力好,对防治PCM有一定指导意义。
2023年07期 v.26 543-547页 [查看摘要][在线阅读][下载 1571K] - 孙亚君;邹芳芳;邹腾跃;尹俊倩;毕铁强;
目的:探讨三阴性乳腺癌(TNBC)中烟酰胺磷酸核糖基转移酶(Nampt)的表达及与Ki67的关系,为TNBC的治疗找到新的靶点及预测指标。方法:选取2013年1月—2017年12月山东大学附属威海市立医院甲状腺乳腺外科400例乳腺癌患者的临床资料,未行化疗且病历资料完整,根据其免疫组织化学及荧光原位杂交检测结果将其分为TNBC和非TNBC。调取其手术后组织蜡块制作组织芯片,运用免疫组织化学技术测定不同类型乳腺癌组织中Nampt及Ki-67的表达情况。利用SPSS23.0对结果进行分析,利用χ~2检验对TNBC及其他类型乳腺癌中Nampt的表达率进行组间比较。采用二元Logistic回归对TNBC中Nampt的表达与临床病理学特征之间的关系进行分析。运用线性回归方法检验Nampt与Ki67表达之间的关系;采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线。结果:TNBC组织中Nampt的表达率高于其他类型的乳腺癌(54.3%比14.7%,P<0.05);在TNBC中Nampt的表达程度与淋巴结转移情况相关(P=0.026),与肿瘤大小及年龄无关(P>0.05);在TNBC中,Nampt的表达越高,Ki67的表达越高(r=0.671,P<0.001),Nampt高表达患者的3年无病生存期低于Nampt低表达患者(P=0.023)。结论:Nampt在TNBC中的表达率更高,这可能与TNBC的高侵袭性相关,高表达的Nampt可能预示着不良预后,Nampt有望联合Ki67成为指导TNBC预后及治疗的新靶点。
2023年07期 v.26 548-552页 [查看摘要][在线阅读][下载 1637K]